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既然皇帝有病，那就有可能找机会谋害他。
至于由谁去实施这一计划，人们做出两种假设：一是李莲英，二是袁世凯。
李莲英是一个八面玲珑、对谁都能讨好的人，而且在“西狩”
时还获得了光绪帝的感激，他最能取得光绪帝的信任，下毒最方便。
至于袁世凯，他曾经是光绪帝最倚信的人，但他在戊戌政变中最后投靠了慈禧，对维新派进行残酷镇压，他担心慈禧死后自己遭到光绪帝报复，所以收买光绪帝身边的内监宫女或近身侍卫帮他实施谋杀，这种猜测也不是不可能。
而且，袁世凯还有其他方面的动机。
他之所以对宪政改革如此热心，是因为他认为立宪能给他个人带来很多好处，一旦朝廷实行君主立宪，作为身兼多职、大权在握的朝中第一重臣，他极有可能被推选为最高领导人，而对他构成最大威胁的显然是光绪帝，所以必欲除之而后快。
据老太监李长安回忆，光绪帝去世前一天，精神状态还很好，而且有人亲眼看到光绪帝站着和人说话。
但是，在喝了一碗由袁世凯进献的药方熬的药后，很快就传出光绪帝病危的消息。
当然，仅凭袁世凯一个人来完成毒害光绪帝的计划是不可能的。
要想在实施谋杀行动后不被追究弑君之罪，必须得到慈禧的支持配合，至少要经她同意。
如果没有慈禧的幕后主使和策划，袁世凯怎敢明目张胆地在所进汤药中下毒？
恽毓鼎认为，慈禧最有可能指使亲信太监李莲英下毒手。
恽毓鼎长期任内宫起居注官，他指出，慈禧宣布光绪病重和“百日维新”
后废立风波的做法一样。
而曾在宫中担任女官的德龄在《瀛台泣血记》等书中，明确地指出正是李莲英下毒害死了光绪帝。
不过，光绪帝去世前两年她便已经离开皇宫，并没有掌握多少第一手资料。
其二，饥饿而死之说。
很多人不相信垂垂老矣的慈禧会为了朝政大权谋害光绪帝，因为在“西狩”
回京之后，光绪帝就把自己幽禁起来，根本没有治理朝政的心思；况且慈禧要重立嗣子也不那么容易。
清宫太监孙耀庭在回忆录《清宫琐谈》中说，光绪帝实则死于饥饿。
他当时在涵元殿看到光绪帝胸腹塌陷，肩胛暴突，肋骨支离，眉宇紧蹙，张着嘴巴，青白的脸和手臂泛着冷光……光绪帝本无大病，诸医开方皆以平和之剂为药，然而，在瀛台服侍的太监们在光绪帝死前就已得到光绪帝驾崩的消息。
当时，“在瀛台侍疾者共六名，其中二人饿死，剩下几人食不果腹，因饿失血者又凡三人”
。
光绪帝死前在**召唤医生周某，他两眼瞪大，四次用手指口。
周某知道光绪帝很饿，但实在没有吃的，就连他本人也三天没有进食了。
后来，光绪帝便渐无声息。
不久，醇亲王入见，周某报告说皇帝已经脉绝，醇亲王用镜子试皇帝气息，确信其已死亡，于是匆匆离去。
过了一会儿，隆裕皇后赶来探视，随后便把皇帝驾崩的消息公之于世。
其三，不明怪病致亡之说。
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